中华临床医师杂志（电子版） 2008年5月,2卷5期

临床研究

趋化因子受体CCR7在食管癌及转移淋巴结中的表达意义

樊祥奎，严瑞华，王磊

樊祥奎、王磊，山东省泰安市中心医院肿瘤中心，271000；严瑞华，山东省煤炭泰山疗养院内二科

摘要:目的　探讨食管癌原发灶及淋巴结转移灶中趋化因子受体CCR7的表达特点及其意义。方法　对56例行食管癌根治术的食管癌组织标本及其中40例淋巴结转移灶采用免疫组化法检测CCR7表达。结果　CCR7在60.7%(34/56)食管组织中呈阳性表达，40例食管癌原发灶和淋巴结转移灶中CCR7高表达的阳性率分别为89.2%(33/40)、80%(32/40)，两部位CCR7表达具有较高的同源性。CCR7表达与淋巴结转移(P<0.01)、浸润深度(P<0.01)、肿瘤分期(P<0.01)密切相关，但与手术年龄、性别、肿瘤大小及分化程度无关。CCR7表达对食管癌淋巴结转移判断的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别为89.2%(33/40)、93.7%(15/16)、97.1%(33/34)、68.2%(15/22)。结论　CCR7表达与食管癌淋巴结转移密切相关，CCR7在食管癌原发灶及转移淋巴结中的表达具有较高的同源性，CCR7表达对食管癌手术方式的选择及非手术治疗选择靶点具有指导价值。

关键词:趋化因子受体CCR7；食管癌；移淋巴结

Expression and clinical significance of chemokine receptor CCR7 in esophagus carcinoma and its corresponding lymph node metastasis

FAN Xiang-kui，YAN Rui-hua，WANG Lei.

Oncology Center，Taian Central Hospital，Taian 271000，China

Abstract:Objective　To investigate the expression of chemokine receptor CCR7 in esophagus carcinoma and its corresponding lymph node metastasis and the relations with clinicopathologic characterics.Methods　The expression of CCR7 in esophagus carcinoma tissues from 56 patients who underwent curative surgery and 40 cases of lymph node expression and clinical significance of chemokine receptor CCR7 in esophagus carcinoma and its corresponding lymph node metastasis was examined by immunohistochemistry. Results　CCR7 expression was positively expressed in 60.7%(34/56)of the patients.The high expression rate of CCR7 in 40 cases of esophagus primary lesions and corresponding lymph node metastases was 89.2%(33/40) and 80%(32/40)，respectively.In metastasic positive cases，there is a homogeneous expression of CCR7 in the primary lesions and metastasic lymph node.CCR7 expression was significancely higher in the patients with lymph node metastasis than those without lymph node metastasis(P<0.01)，and was also correlated with depth of invasion(P<0.01)，TNM stage(P<0.01)，but not with age at surgery，gender，tumor size and differentiate degree.In the retrospectively study，the sensitivity，specificity，positive predictive value(PPV)，negative predictive value(NPV) of CCR7 expression for lymph node metastasis was 89.2%(33/40)，93.7%(15/16)，97.1%(33/34) and 68.2%(15/22)，respectively.Conclusions　The expression of CCR7 is closely correlated to lymph node metastasis of esophagus carcinoma.In most of the metastasic positive cases，there is a homogeneous expression of CCR7 in the primary lesions and metastasic lymph node.Evalution of the CCR7 expression seems to improve the selection of patients for local treatment and might constitute targets for nonsurgical theraphy.

Keywords:Esophageal neoplasms； Receptor，chemokine； Lymphatic metastasis

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　　近年来研究表明，趋化因子与其受体结合可以促进肿瘤细胞的增殖、肿瘤血管的生成以及肿瘤细胞定向迁移[1-2]。CCR7为CCR类趋化因子受体，在黑色素瘤、乳腺癌、非小细胞肺癌、胃癌和结肠癌等肿瘤细胞中高度表达，且其表达与肿瘤的浸润和淋巴结转移等因素密切相关[3-6]。我们在此运用免疫组化方法研究探讨趋化因子受体CCR7在食管癌及转移淋巴结中的表达及其临床意义。
 
资料和方法
　　一、一般资料
　　收集泰安市中心医院肿瘤中心2006年12月至2007年12月行食管癌根治术的食管癌及区域淋巴结标本56例，所有患者术前均未行放、化疗，其中男30例，女26例，年龄34～76岁，中位年龄61岁。组织学分类均为鳞状细胞癌，分化程度：高中分化24例，低分化32例；癌转移情况：伴淋巴转移40例，无转移16例。全部病例均行手术，并经病理证实。
　　二、免疫组织染色
　　采用S-P法，鼠抗人CCR7购于武汉博士德生物工程有限公司，S-P染色试剂盒购于北京中杉金桥生物技术有限公司，严格按照试剂盒操作程序进行。CCR7采用已知阳性的食管癌组织切片，在同一条件下染色作为对照，PBS代替一抗作阴性对照。
　　三、免疫组织染色判断标准
　　低倍镜下选取CCR7蛋白阳性的癌细胞最密集区，然后在高倍镜视野下计数2～3个视野的癌细胞，以CCR7蛋白阳性细胞占肿瘤细胞的百分率来表示，在组织切片中显示胞浆或和胞膜染色棕黄色至棕褐色为阳性细胞的标志，阳性细胞率>10%为阳性。同时，忽略较弱或可疑的染色。
　　四、统计学处理
　　应用统计软件SPSS 10.0统计软件包处理数据，组间比较采用χ2检验，配对计数资料采用McNemar检验。
 
结　　果
　　一、CCR7在食管癌组织标本中的表达
　　本试验采用免疫组化染色技术对56例食管癌原发灶及40例转移淋巴结进行CCR7表达检测，结果发现，34/56(60.7%)食管癌原发灶为CCR7阳性，32/40(80%)转移淋巴结中有CCR7高表达，其中31例与原发灶同时性表达；1例仅为淋巴结转移灶内呈阳性表达，而原发灶为阴性。食管癌细胞CCR7表达于细胞膜或(和)细胞质内，正常肠管黏膜没有染色。
　　二、CCR7表达与食管癌患者临床病理特征的关系
　　比较CCR7阳性和CCR7阴性的两组食管癌病例的几个临床病理参数，CCR7阳性表达在不同TNM分期，浸润深度的食管癌中，差异具有显著统计学意义(P<0.01)，伴淋巴结转移的食管癌的CCR7表达明显高于无淋巴结转移的食管癌的CCR7的表达。在40例伴有淋巴结转移的病例中，共有89.2%(33/40)的原发灶为CCR7阳性，而在16例无淋巴结转移的病例中，6.3%(1/16)为CCR7阳性，二者相比，差异具有显著统计学意义(P<0.01)，CCR7表达对食管癌淋巴结转移判断的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别为89.2%(33/40)、93.7%(15/16)、97.1%(33/34)、68.2%(15/22)，CCR7表达与性别、手术时年龄、肿瘤大小、组织分化程度无关。CCR7表达与食管癌临床病理特征的相关性见表1，食管癌原发灶及转移淋巴结中CCR7表达见表2。
 
表1　56例食管癌患者与临床病理特征的相关性
项目
例数
CCR7表达(例)
χ2值
P值
阳性
阴性
性别
 
 
 
 
 
　男
　女
30
26
18
16
12
10
0.014
>0.05
年龄
 
 
 
 
 
　＜60岁
　≥60岁
27
29
18
16
9
13
0.775
>0.05
肿瘤大小
 
 
 
 
 
　＜4 cm
　≥4 cm
34
22
23
11
11
11
1.744
>0.05
分化程度
 
 
 
 
 
　高　中
　低　未
22
34
14
20
8
14
0.130
>0.05
浸润深度
 
 
 
 
 
　T1 T2
　T3 T4
21
35
7
27
14
8
10.561
<0.01
淋巴结转移
 
 
 
 
 
　有
　无
40
16
33
1
7
15
27.858
<0.01
TNM分期
 
 
 
 
 
　Ⅰ Ⅱ
　Ⅲ Ⅳ
26
30
8
26
18
4
18.246
<0.01
 
 表2　56例食管癌患者原发灶及转移淋巴结中CCR7表达(例)
淋巴结
原发灶
CCR7阳性
CCR7阴性
CCR7阳性
31
1
CCR7阴性
2
6
 
 讨　　论
　　趋化因子及其受体在肿瘤发生发展过程中的作用备受关注。趋化因子(chemokines)是能使细胞发生趋化运动的小分子细胞因子，趋化因子受体(chemokines receptors)是能够特异性结合趋化因子的7次跨膜G蛋白偶联受体。趋化因子受体分为4个亚家族：CXCR、CCR、CR、CX3CR，CCR7为CCR类。最近研究显示，CCR7高表达于某些肿瘤细胞，其配体CCL21、CCL19主要表达在淋巴结、非淋巴组织的内皮淋巴导管、T细胞区。配体对受体的吸引可以促进CCR7表达阳性的肿瘤细胞沿配体浓度梯度定向转移，可能形成了肿瘤转移的机制。实验研究表明，激活的树突细胞通过CCR7依赖型机制，通过淋巴管定位于淋巴结内。CCR7及其配体CCL21在淋巴细胞定居于次级淋巴器官过程中扮演十分重要的角色。最近的体外实验研究表明，CCR7可表达于某些肿瘤细胞上，而其配体CCL21/6Ckine则在淋巴结中高表达，CCL21/6Ckine可诱导表达CCR7的肿瘤细胞发生肌动蛋白凝集和伪足形成，这是肿瘤细胞发生浸润转移的前提，同时也说明了表达于肿瘤细胞上的趋化因子受体CCR7是有功能的[4]。在临床病理学研究中发现，CCR7表达与淋巴管浸润、淋巴结转移呈正相关，在非小细胞肺癌、乳腺癌、食管上皮细胞癌及结直肠癌中已得到证实，并展现出较好的临床应用前景[7-8]。
　　本试验采用免疫组化染色法对56例食管癌组织标本及40例转移淋巴结内癌组织的CCR7表达情况进行分析发现，CCR7主要表达于食管癌细胞的细胞膜或(和)细胞质内，食管癌原发灶内CCR7表达的阳性率在伴有淋巴结转移的病例中为89.2%(33/40)，而在无淋巴结转移的病例中为6.3%(1/16)，二者相比，差异具有显著统计学意义(P<0.01)，CCR7表达对食管癌淋巴结转移判断的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别为89.2%(33/40)、93.7%(15/16)、97.1%(33/34)、68.2%(15/22)，提示食管癌组织CCR7表达与淋巴结转移密切相关。对CCR7表达阳性和阴性的两组病例进行比较，证实CCR7表达与肿瘤浸润深度、临床分期密切相关，而与肿瘤的大小、分化程度、患者年龄及性别无明显相关性。Ding等[8]研究指出，食管癌中CCR7表达与肿瘤分型、年龄、性别无关，与肿瘤分期、分化、淋巴结转移、远处转移有关。本结果与其研究基本相符合。试验中，对40例伴淋巴结转移的食管癌原发灶及转移淋巴结同时进行CCR7表达检测，共有31例为同时性表达，2例为仅为原发灶表达阳性，1例仅为转移灶CCR7表达阳性，提示CCR7在食管癌原发灶及淋巴结转移中的表达具有较高的同源性。检测食管癌组织CCR7表达对预测淋巴结转移具有较高的判断价值；临床工作中对术前镜检标本或前哨淋巴结标本进行CCR7检测有助于手术方案的选择。Wiley等[9]的实验研究表明，CCR7表达加强了鼠黑色素瘤细胞转移至区域淋巴结，抑制CCL21/6Ckine可阻碍淋巴结的转移。检测食管癌标本中CCR7的表达对选择新的治疗靶点具有指导意义。因此，对食管癌患者行CCR7表达检测，不仅可预测淋巴结的转移，而且对手术方案的选择及术后治疗选择新的治疗靶点均具有重要价值。

参考文献

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(编辑：乔　晓 收稿日期：2008-01-29)